Молекулярна діагностика відповідає набору молекулярних методик, спрямованих на виявлення змін у ДНК, які можуть свідчити, наприклад, про генетичні захворювання або рак. Крім того, широко використовуються молекулярні методи для ідентифікації та підтвердження інфекційних захворювань, оскільки вони представляють більш швидкий і точний метод діагностики.
Молекулярна діагностика дорога і, отже, не дуже часто її запитують лікарі, проте вона дає точні результати щодо наявності змін, способу, який може перешкоджати функціонуванню організму та реакції пацієнта на лікування.
Для чого це
Молекулярна діагностика може бути виконана з декількома цілями, основними з яких є:
- Виявлення мутацій, пов’язаних з лейкемією, таких як ідентифікація транслокації BCR-ABL, характерної для хронічного мієлоїдного лейкозу (ХМЛ); Характерні мутації гематологічних захворювань, таких як спадковий гемохроматоз, поліцитемія, есенціальна тромбоцитемія та тромбофілія, наприклад Молекулярні зміни, які вказують на виникнення раку, наприклад, колоректальний, легеневий, рак молочної та головного мозку, наприклад; Діагностика інфекційних захворювань, таких як гепатит, уретрит, токсоплазмоз, лейшманіоз тощо, крім ідентифікації вірусу ВПЛ.
Молекулярна діагностика, незважаючи на те, що вона вважається дорогою порівняно з іншими методами діагностики, є більш точною, оскільки вона здатна інформувати про зміни, пов'язані з певним захворюванням, та про ступінь впливу цієї зміни в організмі, тим самим допомагаючи лікуванню людини.
Окрім того, що використовується для діагностики різних захворювань, молекулярні методики також використовуються для оцінки реакції на лікування, особливо у людей, хворих на рак, які є одним з найефективніших методів вказування на прогресування захворювання та рецидив.
Як це робиться
Молекулярна діагностика може бути проведена з будь-яким зразком, за запитом лікаря, який може найкраще надати інформацію про стан пацієнта, яка може бути сечею, слиною або, в більшості випадків, кров’ю. Немає необхідності в пості або будь-якій іншій підготовці до іспиту.
Зразок відбирають та направляють у лабораторію разом із керівництвом лікаря, який інформує про іспит чи тип дослідження, який слід провести. Молекулярна методика, що виконується, залежить від запитуваного обстеження і включає низку точних процедур, спрямованих на виявлення наявності чи відсутності змін, які вимагає лікар.
Зазвичай використовується лише невелика кількість відправленого зразка, решта зберігається так, що, при необхідності, іспит повторюється.
Подивіться, які основні молекулярні методи
ПЛР
ПЛР, короткий для ланцюгової реакції полімерази або полімеразної ланцюгової реакції , - це молекулярна методика, яка полягає в ампліфікації фрагмента генетичного матеріалу, або ДНК, або РНК, з метою ідентифікації мутацій і, таким чином, допомоги в діагностиці захворювань.
Ця методика виготовляється з вилучення та очищення генетичного матеріалу, який потім поміщають у суміш, в якій один із компонентів є рестрикційним ферментом, який змінюється залежно від запитуваної експертизи та функцією якого є розрізання матеріалу на фрагменти так що можна виявити можливі генетичні зміни. Суміш поміщають у термоциклер, який представляє собою пристрій, який діє через зміни температури, вказані фахівцем згідно з іспитом, і, таким чином, дозволяє посилити генетичний фрагмент. У разі звичайної ПЛР після ампліфікації продукт ПЛР піддають електрофорезу, який є молекулярною технікою, заснованою на вазі та розмірі фрагментів, тобто за цими характеристиками формується смугова картина, аналіз якої робиться заснований на смузі позитивного контролю, тобто смузі, яка, як відомо, відповідає генетичній зміні.
ПЛР у реальному часі, який також називають qPCR, є типом кількісної ПЛР, тобто, крім ідентифікації генетичної зміни, він здатний надати інформацію про експресію генів, тобто на скільки виражений змінений ген в організмі. таким чином, його можна використовувати для сприяння діагностиці та контролю за лікуванням. ПЛР у режимі реального часу не потребує електрофорезу, весь процес ампліфікації та аналізу генетичного матеріалу виконується пристроєм, а результат інтерпретується кваліфікованим медичним фахівцем.
Послідовність
Послідовність - це молекулярна техніка, яка складається з визначення послідовності нуклеотидів ДНК, які є формуючими одиницями генетичного матеріалу. Послідовність послідовностей відбувається за реакцією, подібною до ПЛР, однак у ампліфікаційну суміш модифіковані нуклеотиди додаються додаванням фторхромів, які в міру ампліфікації матеріалу модифіковані нуклеотиди включаються в ДНК і утворюють кілька фрагментів, які відповідають твору послідовності.
Продукт реакції поміщають у пристрій, зване секвенсором ДНК, в якому, коли фрагменти досягаються лазером обладнання, фторхроми збуджуються, випромінюючи флуоресценцію, що вказується обладнанням за допомогою піків, при цьому кожен пік відповідає до нуклеотиду. Після закінчення реакції обладнання інформує послідовність ДНК, таким чином, зможе допомогти лікареві в діагностиці генетичних захворювань.
